迪马科技外用人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶中纯度与对羟基苯甲酸甲酯的测定

外用人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶（rhGM-CSF凝胶）系由重组大肠埃希菌表达、纯化后加入凝胶基质及辅料制成的外用制剂。2025年版《中国药典》三部收载该品种质量标准，涵盖生物学活性、鉴别、纯度、抑菌剂含量、装量及无菌检查等项目，其中纯度检查与抑菌剂含量测定属液相色谱控制的关键质量项目。

纯度检测采用体积排阻色谱（SEC）进行分子大小变异体分析，其难点在于：重组蛋白高级结构与活性密切关联，SEC需在温和生理条件下运行，对填料惰性与生物相容性要求高；凝胶基质中羧甲基纤维素钠、甘油、聚山梨酯80等辅料易产生非特异性吸附或共洗脱，干扰测定准确性；SEC柱装填工艺及孔径均一性决定理论塔板数，该指标系药典系统适用性的硬性要求。

抑菌剂检查针对该品种仅有抑菌剂对羟基苯甲酸甲酯，药典规定采用反相液相色谱法。挑战在于：目标物含量低（约1 μg/mL），属痕量检测，基质中高浓度辅料易产生干扰，对色谱柱选择性与分离度要求较高；同时，对羟基苯甲酸甲酯极性较弱，其在C18柱上的保留行为与峰形对封端技术和硅胶纯度敏感，直接影响积分准确性与定量可靠性。

针对上述难点，本实验分别选用迪马科技两款色谱柱进行方法重现：Dikma Protein SEC-400（8.0 mm×300 mm，5 μm）用于纯度分析，主峰理论塔板数约20390；Diamonsil C18(2)（4.6 mm×250 mm，5 μm）用于抑菌剂检查，目标峰形对称，理论塔板数大于15000。结果表明，两款色谱柱均满足药典系统适用性要求，为国产色谱柱在该品种质量控制中的应用提供了实验依据。

• 方法：

• 液相

• 基质：

• 外用人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶

• 应用编号：

• 102888

• 化合物：

• 人粒细胞巨噬细胞刺激因子、对羟基苯甲酸甲酯

• 色谱柱：

• Dikma Protein SEC-400 5μm 300 x 8.0mm
  Diamonsil C18(2) 5μm 250 x 4.6mm