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液相色谱柱的平衡和日常使用保养方法

点击次数:4 发布时间:2022-09-22 返回
   液相色谱柱的平衡:
  由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。一定确保分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,就会在处理问题方面获得较大的"补偿",而且色谱柱的寿命也会变得更长!
  操作步骤:
  a、平衡开始时将流速缓慢地提高,用色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)。
  b、如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
 
  液相色谱柱的日常使用保养:
  ·使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度);
 
  ·注意色谱的pH范围,大多数色谱柱的pH稳定范围是2-8;
 
  ·避免流动相组成及极性的剧烈变化;
 
  ·使用HPLC级试剂,流动相使用前必须经脱气和过滤处理;
 
  ·如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕将柱子冲洗干净并保存在乙腈中;
 
  ·压力升高是需要更换预柱的信号;
 
  ·确认流动相中缓冲盐的溶解性;
 
  ·确认样品在流动相中的溶解性;
 
  ·避免压力的突变。
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